تحضير المواد والصبغات اللازمة لتجارب الأحياء
تحضير المواد والصبغات اللازمة للإجراء تجارب الأحياء
تحضير الأملاح حسب التركيز المئوي
يؤخذ من الملح المراد تحضيره بالتركيز المئوي س جرام وتذاب الكمية في 100 ملل ماء مقطر فيصبح التركيز س% .
مثال : عند تحضير محلول كلوريد الصوديوم بتركيز 2%
نأخذ 2 جم من الملح ويذاب في 100 ملل ماء مقطر .
وهكذا بالنسبة لبقية الأملاح .
1- تحضير المواد السائلة مثل الأحماض بالتركيز المئوي
يؤخذ من الحمض المراد تحضيره بالتركيز المئوي س ملل وتضاف إلى 100 ملل من الماء المقطر فيصبح التركيز س% .
مثال : عند تحضير محلول حمض الهيدروكلوريك بتركيز 1%
نأخذ 1 ملل من الحمض ويضاف إلى 100 ملل من ماء مقطر .
وهكذا بالنسبة لبقية المواد السائلة .
2- تحضير المواد الصلبة والسائلة بالتركيز الوزني الجزيئي
يحسب الوزن الجزيئي للمركب ثم يضاف إلى لتر من الماء المقطر
مثال : عند تحضير 1 جزيئي وزني من حمض الهيدروكلوريك ( الوزن الجزيئي له 36.45 ) فيضاف 36.45 ملل من الحمض إلى لتر من الماء المقطر .
3- صبغة أزرق الميثيلين
مسحوق أزرق الميثيلين 0.3 جرام
كحول إيثيلي 95% 30 ملل
ماء مقطر 100 ملل
أذب أزرق الميثيلين في الكحول ثم أضف الماء المقطر ورشح المحلول
4- صبغة السفرانين
مسحوق السفرانين 0.25 جرام
كحول إيثيلي 95% 10 ملل
ماء مقطر 100 ملل
أذب السفرانين في الكحول ثم أضف الماء المقطر ورشح .
5- صبغة أحمر الكونغو
مسحوق أحمر الكونغو 3 جم
ماء مقطر 100 ملل
6- صبغة اليود
يود 1 جم
يوديد البوتاسيوم 2 جم
ماء مقطر 300 ملل
يذاب يوديد البوتاسيوم أولاً ثم يضاف اليود بعد ذلك ويرج المزيج حتى يذوب , ويمكن طحن اليود مع يوديد البوتاسيوم في هاون مع إضافة الماء بالتدريج .
7- كاشف الفينول فيثالين 0.25 %
يذاب 0.25 جم من مسحوق الفينول فيثالين مع كمية 20 ملل من الكحول الإيثيلي ثم يكمل المحلول إلى 100 ملل من الماء المقطر .
8-دليل النشا 2% :
2 جم بودرة النشا تذاب في 100 مل ماء مقطر .
9- صبغة الكريستال البنفسجي Crystal violet أو الجنشيان البنفسجي Gentian violet ( صبغة جرام ) :
ïپ® محلول أ
مسحوق الكريستال البنفسجي 4 جرام
كحول إيثيلي 95% 20 ملل
ïپ® محلول ب
أكسالات أمونيوم 0.8 جرام
ماء مقطر 80 ملل
اخلط محلول أ,ب بكميات متساوية ويفضل تخفيف محلول أ عشر مرات على أن يخلط 20 ملل من المحلول أ بعد التخفيف بكمية متساوية من المحلول ب .
10-صبغة الكارمن الخلي :
حمض خليك تركيز 45 % ** 100 مل
مسحوق أحمر كارمن 10 جم
ضع مسحوق الصبغة في حمض الخليك ثم اغليه في الحمام المائي لمدة 5 دقائق ثم يبرد ويرشح .
يجفف الراسب المتكون ( الكارمن الحامضي ) على ورق الترشيح ثم يؤخذ ويخلط 1 غم منه مع 10 غم من هيدروكسيد البوتاسيوم مع 200 مل من الماء المقطر ثم تسخن حتى تذوب ثم يرشح الخليط ويضاف له بلورات من الثايمول لمنع التعفن .
11- الأخضر الضوئي light green :
يوضع 100 مل كحول إيثيلي 95 % في دورق زجاجي نظيف ويضاف 1 غم من الأخضر اللامع ويمزج حتى الذوبان .
12- كاشف بندكت :
محلول أ – 100 جم سترات الصوديوم , 600 مل ماء مقطر دافئ , 90 جم كربونات صوديوم لا مائية ويسخن المحلول حتى تذوب الأملاح .
محلول ب -175 جم كبريتات نحاس , 100 مل ماء مقطر
يمزج المحلولين أ , ب ويكمل الحجم إلى اللتر ويحفظ في مكان بارد .
13- كاشف سودان ( يوجد منه عدة أنواع كما يلي )
أ - سودان 3 الكحولي :
200 مل كحول إيثيلي 70% تضاف إلى 2 جم من مسحوق سودان 3 يغلق بسدادة ويغلى المزيج في حمام مائي ثم يترك ليبرد ثم يرشح في اليوم التالي .
ب – سودان IV
محلول مشبع من سودان IV في كحول إيثيلي بتركيز 70 % ويوضع في زجاجة محكمة الإغلاق . ويترك المحلول لمدة 3 أيام قبل الإستعمال .
14-فهلنج أ و ب :
فهلنج أ -69 جم كبريتات نحاس تذاب في لتر من الماء .
فهلنج ب -346 جم طرطرات البوتاسيوم والصوديوم مع 140 جم من هيدروكسيد الصوديوم تذاب في لتر من الماء .
15-أحمر كارمن شبي ( قاعدي ) أو صبغة القرمز:
1 لتر ماء مقطر , 40 غم هيدروكسيد صوديوم , 10 غم أحمر كارمن يغلى المزيج على نار هادئة لمدة 20 دقيقة ثم يبرد ويرشح ويضاف للرشاحة 1 غم فينول لمنع التعفن .
16-مثبت بوان :
60 مل من حمض بكريك ( محلول مائي مشبع ) , فورمالين مركز 30 مل , حامض خليك مركز 10 مل .
17- صبغة الروز بنغال :
1 جم مسحوق الروز بنغال يذاب في 150 مل ماء مقطر .
18- صبغة رايت :
0,1 جم مسحوق صبغة رايت تذاب في 60 مل من كحول الميثيل يذاب جيداً ويترك المحلول لمدة يومين ثم يرشح .
19- كاشف موليش :
5 جم ألفانافثول تذاب في 250 مل كحول إيثيلي .
20- الفورمالين :
أ- يحضر من الفورمالدهيد ذو التركيز 38 % فيخفف بالماء المقطر للحصول على التركيز المناسب من الفورمالين .
ويحضر مثبت الفورمالين لحفظ العينات كما يلي :
ماء مقطر 900 مل
فوسفات الصوديوم ثنائي الهيدروجين 3,5 جم
فوسفات ثنائي الصوديوم أحادي الفوسفات 6,5 جم
فورمالين 100 مل
تحفظ العينات النسيجية في هذا المثبت لفترة غير محدودة .
ب- فورمالين ملحي
فورمالين مركز 10 مل
كلوريد صوديوم 0.85 غم
ماء مقطر 90 مل
تحفظ العينات في هذا المحلول لفترة غير محدودة
ج – الفورمالين الكلسي
كلوريد الكالسيوم اللامائي 1 غم
فورمالين مركز 10 مل
ماء مقطر 90 مل
21-محلول رينجر المنظم :
كلوريد صوديوم 0.03 جم , كلوريد البوتاسيوم 0,025 غم , ماء مقطر 100 مل .
* لذوات الدم الحار يستعمل 0,9 جم كلوريد صوديوم أما لذوات الدم البارد يستعمل 0,65 جم من الملح مع 0,02 بيكربونات الصوديوم .
22- مثبت كارنوي :
حمض خليك ثلجي 10 مل , كحول إيثيلي مطلق 60 مل , كلوروفورم 30 مل .
23-صبغة الهيماتوكسيلين Haematoxylin stain :
ومنها أ- ديلافيلد هيماتوكسيلين Delafield`s haematoxylin :
400 مل محلول مائي مشبع من كبريتات الأمونيوم النشادرية تضاف قطرة قطرة إلى
محلول 4جم بلورات الهيماتوكسيلين المذابة في 25 مل من 95% كحول إيثيلي ( يترك المحلول بعد غلق الدورق معرضاً للشمس لمدة 4 أيام )
يضاف 100 مل جليسرين للدورق و 100 مل من الكحول الإيثيلي المطلق ثم يترك الدورق مرة أخرى معرضاً للشمس والهواء لمدة 6-8 أسابيع حتى يصبح أسود اللون .
ب- هيماتوكسيلين هاريس Harris haematoxylin:
5 جم من بلورات الهيماتوكسيلين
1000 مل كحول إيثيلي تركيز 50%
3 جم هيدروكسيد أمونيا أو البوتاسيوم
6جم أكسيد الزئبقيك
تذاب الصبغة والهيدروكسيد في الكحول مع التسخين ويضاف أكسيد الزئبقيك أثناء الغليان ويستمر في الغليان حتى يصبح لون المحلول أرجواني ثم يبرد بالماء ثم يضاف بضع قطرات من حمض الهيدروكلوريك لتصبح صبغة حامضية .
ج- هيماتوكسيلين ايرليك Ehrlich`s haematoxylin :
1 جم هيماتوكسيلين
50 مل كحول إيثيلي مطلق
50 مل ماء مقطر
50 مل جليسرين
5 مل حمض خليك ثلجي
3 جم شب البوتاسيوم ( هيدروكسيد بوتاسيوم ).
تذاب المواد السابقة وتترك الصبغة في قنينة في مكان مظلم لمدة 6-7 أسابيع حتى تصبح ذات لون أحمر .
24- صبغة الهيماتين Hematein :
0.5 جم هيماتين ( يطحن قبل الإستخدام )
10 مل كحول إيثيلي تركيز 95%
500 مل محلول مائي لشب البوتاسيوم تركيز 5%
25- صبغة الأخضر السريع fast green stain :
1جم من الصبغة تذاب في 100 مل كحول إيثيلي مطلق وزيت القرنفل 100 مل .
26- الأيوسين واي EosinY :
يذاب 1 جم من الصبغة في 100 مل ماء مقطر
27- الفوكسين ( الفيوشين ) الحامضي :
أ- يذاب 1 جم من الصبغة في 100مل كحول إيثيلي 70% أو 100 مل ماء مقطر .
ب- فوكسين حامضي 0.5 جم يذاب في ماء مقطر 100 مل .
28- أزرق الأنيلين
يذاب 1 جم من الصبغة في 100 مل من 90% كحول إيثيلي ثم يضاف 10 مل من حمض الهيدروكلوريك 10 عياري .
29- الأحمر المتعادل Neutral red
1 جم من الصبغة تذاب في 2 مل حمض الخليك 1% مع 1000 مل ماء مقطر .
30 – برتقال ج orange G
1 جم من الصبغة تذاب في 100 مل كحول مطلق ثم يضاف 100 مل من زيت القرنفل ثم يبخر المحلول إلى أن يصل 100 مل ثم يستعمل .
31 – محلول أزرق الأنيلين وأورانج G :
أزرق أنيلين ( ذائب في الماء ) 0.5 جم
أورانج G 2 غم
حمض فوسفوتنجستيك 1 غم
ماء مقطر 100 مل
31- المحاليل المنظمة :
أ- محلول الفوسفات المنظم ومنها فوسفات الصوديوم ثنائي القاعدة 0.066 M
9.46 جم في لتر من الماء المقطر .
وفوسفات البوتاسيوم الحامضي 0.06 M الذي يحضر بإذابة 9.08 جم في لتر من الماء المقطر .
ب- حمض الخليك وخلات الصوديوم المنظم ويحضر
* حمض الخليك 0.1 M
يحضر بإضافة 6 مل من الحمض إلى لتر من الماء المقطر .
* خلات الصوديوم 0.1 M
13.6 جم تذاب في لتر من الماء المقطر . أو 0.2 مولار بدرجة حموضة PH 4.8 .
ويمكن استخدامه لتحضير عدة تراكيزمنه حسب الحاجة .
ج- محلول كحولي إيثيلي خلي :
حمض خليك ثلجي 100 مل
كحول إيثيلي مطلق 300 مل
يمكن استخدامه لمدة طويلة .
32- متفاعل شيف :
فوكسين قاعدي BASIC FUCHSIN 1 غم
ماء مقطر 400 مل
كلوريد الثيونيل THIONYL CHLORIDE (SOCL2) ا مل
فحم نباتي منشط 2 غم
يذاب الفوكسين في الماء المقطر عند درجة الغليان ثم يبرد عند 50 ْم ثم يرشح , ثم يضاف 1 مل من كلوريد الثيونيل ويترك المحلول في زجاجة مغلقة في الظلام لمدة 12 ساعة , ثم يروق المحلول بالرج مع الفحم المنشط لمدة دقيقة لإزالة آثار اللون الأحمر ثم يرشح و يخزن الراشح في زجاجة في الظلام عند 4 ْم . ( يستعمل هذا المحلول خلال 6 أشهر ولا يستعمل إذا ظهر باللون الأحمر )
33 _ محلول بوتاسيوم ثنائي الكبريتيت :
يذاب 5 غم من بوتاسيوم ثنائي الكبريتيت K2S252 في لتر من الماء ثم يضاف للمحلول 3 – 5 مل من حمض الهيدروكلوريك المركز . ( يحضر المحلول عند الإستعمال فقط )
34- أخضر ميثايل MEHYL GREEN
أذب 2 غم من أخضر الميثايل في 100 مل من الماء المقطر ثم يرج الخليط في قمع فصل بعد إضافة 100 مل من الكلوروفورم .
تخلص من الكلوروفورم وهي الطبقة الأثقل , وتعاد هذه الطريقة حتى يتم التخلص من الكلوروفورم ( يكون محلول أخضر الميثيل صالحاً للإستعمال لعدة شهور .
35- بايرونين PYRONIN Y
أذب 8.7 غم من بايرونين Y في 175 مل من الماء .
36 – محلول أخضر ميثيل – بايرونين
لا يوجد صيغة ثابتة له ولكن يخلط بعدة نسب ثم يجرب حتى يتم الحصول على أفضل نتيجة .
ولكن ينصح بهذه النسب ( أخضر ميثيل 5 مل + بايرونين Y 8 مل + المحلول المنظم ( خلات الصوديوم ) 13 مل ) .
37- محلول إنزيم الدياستيز
إنزيم الدياستيز 0.1 غم
ماء مقطر 100 مل
38- إندوسيانين B6 اللامع :
إندوسيانين B6 اللامع 40 مغم
كحول إيثيلي خلي 200 مل
تذاب المكونات مع بعضها ويكون المحلول صالح للإستخدام لمدة سنه .
39- أخضر جانوس JANUS GREEN
أخضر جانوس ( مسحوق ) 0.1 غم
محلول ملحي للثدييات 1000 مل
40- صبغة ثيونين THIONIN :
حمض هيدروكلوريك 1 % مائي 2.5 مل
ثيوسلفات الصوديوم 2.48 % مائي 2.5 مل
ثيونين 0.01 % 100 مل
يترك المحلول بعد التجهيز في الظلام لحين استخدامه ويراعى أن يكون المحلول قد فقد لونه عند الإستخدام ولا يستخدم إن كان المحلول به لون .
41- محلول تنظيف الزجاجيات :
المحلول المركز –ثنائي كرومات البوتاسيوم 20 جم , ماء مقطر 200 مل وبعد أن يبرد المحلول يضاف له حمض الكبريتيك المركز 20 مل .
المحلول المخفف – ثنائي كرومات البوتاسيوم 2 % مائي 9 أجزاء , حمض الكبريتيك جزء واحد .
المصدر: منتديات التفوق - من قسم: تقنيات نباتية وحيوانية
( تقرير عن مشاركة سيئة )، و الموجودة أسفل كل مشاركة .
2017-10-30, 19:34
مساعدة في العلوووووووووووووم
العرض العادي
